EXAMENUL MORFOLOGIC AL FROTIULUI SANGUIN

Examenul morfologic al frotiului sanguin  colorat May Grunwald Giemsa evalueaza:

• eritrocitele: anomalii de marime, forma, structura, incluzii eritrocitare, continut de hemoglobina;

• leucocitele: anomalii structurale, prezenta de incluzii, prezenta formelor atipice, imature;

• trombocitele: anomalii de marime, de forma, de structura , de dispozitie pe frotiu.

Examinarea frotiului sanguin se realizeaza la solicitarea expresa a clinicianului precum si la mesajele de avertizare din hemoleucograma efectuata pe  analizorul automat  de hematologie (e.g., blaşti , limfocite atipice, deviere la stânga , eritroblaşti,etc).

Examenul morfologic al eritrocitelor

Eritrocitele normale morfologic apar ca: normocrome, normocitare, cu forma de disc biconcav, fara incluzii si anucleate. O serie de anomalii eritrocitare pot fi detectate prin examinarea microscopica a frotiului sanguin, astfel [2,11]:

Examenul morfologic al trombocitelor

Se evalueaza  morfologia trombocitara  si se apreciaza numarul  de trombocite pe frotiu   ( evaluare semicantitativa). Trombocitele  sunt  fragmente citoplasmatice de culoare albastru-bleu cu granulaţii fine  azurofile, cu diametrul de   2-4 µm, si forme variabile (frecvent sferice sau elipsoidale) . Numărul de trombocite  estimat pe frotiu este normal daca : prezenţa lor este  5 – 15 /camp de imersie sau  de 1 trombocit la 10-20 de eritrocite .[11]

1. Megatrombocitele  ( > 4 µm diametru)
   1. Productie trombocitara accelerata
   2. Deficit de vit B12
   3. Sindroame mieloproliferative
   4. Trombocitopenia congeniatala (sindromul Bernard-Soulier)
   5. Purpura trombocitopenica imuna (PTI)
2. Fragmente de megakariocite
   1. Mielofibroza
3. Trombocite hipogranulare
   1. Sindrom  mielodisplazic
   2. Mielofibroza
4. Trombocite cu forme bizare, cu granulaţii grosiere grupate central  :                                                                                                       
   1. Boli mieloproliferative   
   2. Postsplenectomie

Examenul  morfologic al leucocitelor.

Cele mai frecvente anomalii morfologice leucocitare sunt reactive, induse de infectii ori de toxicitatea unor substante chimice (e.g medicamente); mai rar intalnite sunt modificarile structural induse de o maturatie anormala (e.g.,asincronism nucleo/citoplasmatic) sau anomaliile congenitale.

●    Modificari de tip degenerativ :

• Celule necrotice /picnotice (proba mai veche de 4 ore; uremie; sepsis)
• Nuclei liberi (leucemie limfatica cronica, blastii din leucemia acuta, artefact)

●   Corpii Barr- material nuclear atasat nucleului, de forma unui “bat de tobosar”care apare doar la persoane de sex feminine (cu cromozom X dominant)

●   Neutrofile hipersegmentate ( > 5 lobi) asociat cu :

• anemia megaloblastica/deficit de folat
• chimioterapie anti-folat (e.g., methotrexat)

  ●  Neutrofile hiposegmentate (2 lobi)

• Anomalia Pelger-Huët (ereditar)
• Neutrofile pseudo-Pelger (sindrom mielodisplazic)

  ●  Neutrofile hipogranulare : neutrofil ce exprima rare granulatii si / sau absenta granulatiilor intracitoplasmatice.

• asociate cu sindromul mielodisplazic

  ●   Anomalia Alder-Reilly: granulaţii azurofile şi bazofile mari, proeminente asemănătoare granulaţiilor toxice (pot fi prezente şi în limfocite şi monocite)

• ereditară,  asociata cu anomalii osoase şi ale cartilajului
• in  mucopolizaharidoze

  ●   Sindromul Chédiak-Higashi : incluzii eozinofile (lizozomi giganti) prezente in :Leucocite

• Ereditar : albinism partial ocular si cutanat, susceptibilitate la infectii bacteriene si discrazie sanguina.

  ●   Neutrofile cu granulatii toxice (persistenta granulatiilor primare , frecvent  asociate cu  Corpi Döhle si cu vacuole)

• Infectii severe sau distructii tisulare
• Medicamente, mai ales factori de crestere granulocitara

   ●  Corpi Döhle ( incluzii citoplasmatice mici, albastre/gri, ovale sau iregulare)

• infectii bacteriene, scaralatina, arsuri, traumatisme, sarcina, medicamente citotoxice
• corpi Döhle de talie mare pot apare in anomalia ereditara May-Hegglin.

    ●  Vacuole intracitoplasmatice (contin enzime cu rol in fagocitoza)

    ●   Eritrofagocitoza ori bacteriofagocitoza – sunt fenomene caracteristice monocitului sau neutrofilului (ambele celule au receptori IgG/C3)

• anemia hemolitica autoimuna la cald
• lupus eritematos diseminat
• sepsis

     ●   Limfocite atipice / reactive apar ca raspuns la diversi stimuli virali sau nonvirali

          Aspect morfologic: forma neregulata a citoplasmei si /sau a nucleului, citoplasma abundenta, bazofila, vacuole intracitoplasmatice, pattern cromatinian fin, uneori cu desen nucleolar (asemanator cu blastii)

• infectii virale (Epstein-Barr, Citomegalovirus, hepatite virale)
• reactive medicamentoase ori stimuli nonvirali (e.g.,toxoplasmoza)

     ●   Limfocite plasmocitoide (celula Turk) sunt forme intermediare de transformare a limfocitului B in plasmocit. Aspectul morfologic: nucleul este central, usor excentric, citoplasma intens bazofila este mai putin abundenta.

• apare in sangele periferic dupa o stimulare antigenica intensa (e.g.,postvaccinare)
• in macroglobulinemia Waldenstrom – ca celule maligne

●   Corpii Russel: incluzii roz, rosii sau incolore in citoplasma plasmocitului implicate in productia de imunoglobuline (celula Mott)

• frecvent intalniti in mielomul multiplu

●   Plasmocitul cu citoplasma ”in flacara” (flame cells): plasmocit cu periferia rosie a   

     citoplasmei 

• apare in mielomul multiplu cu IgA

●  Celula Rieder: nucleu cu ancosa

• limfoame non-Hodkin leucemizate, unele leucemii acute

●  Corpii Auer: incluzii rosii purpurii de forma oval-alungita ce apare doar in citoplasma blastilor de linie mieloida; corpii Auer sunt formati prin fuziunea granulatiilor primare peroxidazo-pozitive.

• prezenta corpilor Auer sugereaza leucemia acuta mieloida
• corpii Auer multiplii apar in leucemia acuta promielocitara